显微镜能够观察立体像并不太困难,实际上把两个功能独立的丛微镜使其光铀以一定小的角度(一般12—14°)连接在一起就可以构成“台实体显微镜。比较原始类型的文体显微镜(图12.4)就是如此,它具有两套明确分离的物镜、镜简和目镜。当然对于立体效果来说,两个分离的镜筒或两个分离的物镜并不一定是必需的。只要一个物镜具有足够大的孔径能够允许互成12一l4。角度的两束光线进入,那么使用—个物镜和钥筒就可以了,实际上大多数现代的实体显微镜都是单物镜和单镜简类型的。
它有一个比较稳同曲镜座,镜体被固定齐镜柱上,物体的聚焦只通过一个粗调旋钮而进行,这对于使用较大约场保和较低的放大倍数观察物体的立体结构来说*够用了。文体显微镜具行较大的自由工作距离,一般为8一12cm,这对于观察各种样品来说也*足够了。在镜座上有一个圆形的载物板,可以放置被观察的样品。——般载物板一面是白色的,另一面是黑色的,灯以根据所观察样品的颜色选用,以达到良好的反差效果。观察使用双目镜筒时,两个目镜简之间的距离可以根据观察者两眼瞳孔间的距离进行调节。
生物显微镜总放大倍数的变换,虽然也可以通过更换物镜而实现,仅达只是在比较原始类型的镜台中,例如在Grceenough型实体显微镜中具有一个滑动型的物镜更换装置,但是由于机械原因及物镜的大孔径,很少使用可转动的物镜转换台。在现代的生物显微镜中,放大倍数的改变是迥过——个可变焦的透镜系统实现的,关于这种可变焦透镜系统的光学原理已经在第四章中讲述过了,它通过在一组透镜系统巾改变中间透镜的位置,来改变放大倍数的。这种中间透镜位置的改变是通过调节放大倍数旋钳来进行的。在一般的生物显微镜中,具有6x、12x、25x、50x几个放大倍数的选择到度。所使用的常用目镜有10x、15x、20x等几种,这样,生物显微镜的总放大倍数在60一1,ooox的范围之内。实际上对于立体现察来说,使用太高的放大倍数时由十场诛的减小,立体效果就会丧失,这种像就会变成物体的薄光学切面,其结果在深度上的差异(这对于立体现察来说是必需的)就不可能被辨认,因此观察标本立体结构只能使用较低的放大倍数。对于较大的标本,如果60x的zui小总放大倍数仍然嫌大,可以再使用一个o.4x的附加物镜,使总放大倍数减小到24x,而使物场的直径由原来的;3.8mm可以增大到88.2mm。与此相反,还可以使用1.6x的附加物镜,来进一步增大总放大倍数。表14中列出了常用的目镜和可变焦透镜系统(以及附加物镜)各种组合时的总放大倍数以及物场直径。
显微镜中形成的像同物体相比是倒立的,在生物显微镜中,这种例立像对于标本的解创或移动操作来说是不太方便的,当一个指针从左下方指着标本时,在显微镜中观察就像是指针来自右上方。为了解决这一问题,所有的实体显微镜都装置了一套倒转棱镜,使形成的倒立像再次倒转成一个直立像。这种像的例转在一般显微镜中是不必要的,而且会引起光能的损失和成像质量的降低。